反映細胞增殖情況;通常連續檢測5天,獲得細胞增殖曲線;檢測細胞增殖最經濟常用的方法,MTT只適用于貼壁細胞,MTS/CCK8可用于懸浮細胞。
因還原生成的甲臜物數量與活細胞的數量成正比,MTT、MTS、CCK-8均可用于細胞增殖的檢測,目前被廣泛應用于抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。
為研究某基因是否是某腫瘤細胞增殖相關的關鍵基因,可將目的基因shRNA慢病毒感染靶細胞,使靶細胞內源表達的目的基因表達下調,隨后用MTT進行檢測,觀察目的基因表達下調后的細胞與對照細胞相比細胞增殖的變化,從而推斷結論。
MTT 實驗結果圖
用待研基因shRNA慢病毒感染A375細胞,3天后收集細胞,按2000/孔的細胞數量接種細胞至96孔板,第二天待細胞貼壁后,開始進行MTT檢測,連續檢測5天,獲得細胞增殖曲線。結果顯示,shRNA下調目的基因表達后,細胞增殖顯著減緩,表明待研基因與A375細胞增殖顯著相關。