技術原理
溴脫氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine, BrdU)是DNA前體胸腺嘧啶核苷類似物,可競爭性摻入S期細胞單鏈DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶,利用抗體連接酶或熒光素作為指示系統標記BrdU,當處于旺盛分裂的細胞摻入BrdU后,即可檢測出含有BrdU的細胞,并以此判斷細胞的數目。固相包被細胞的微孔中加入BrdU抗體,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的BrdU呈正相關。用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度(OD值),通過OD值的高低,反映正在合成DNA細胞數的多少,從而反映正處于增殖狀態的細胞量。
參考文獻
P. Thored, A. Arvidsson, E. Cacci, H,et al,. Persistent production of neurons from adult brain stem cells during recovery after stroke. Stem Cells.2006, 24: 739-747.