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      靶標驗證

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      免疫組化

      利用抗原抗體反應和酶底物顯色處理后,檢測石蠟切片上目的抗原表達強度和細胞定位。

      技術原理

      免疫組化基于利用放射性核素和其他標記物(熒光素,酶,重金屬離子等)作為示蹤劑, 通過免疫親和(抗原-抗體特異性結合)途徑,在組織切片上,原位顯示生物大分子的變化而建立的一門染色技術,常用于蛋白物質的定性、定位檢測。

      常見問題

      Q:無染色或染色弱?

      A:  1.切片過于陳舊,使用新鮮的切片;如果需要進行保存,保存在4°C;

      2.玻片上的組織已干化重新補充水分并在染色過程中保持組織被覆蓋在緩沖液中;

      3.抗原表達太少,可更換效價比更高的抗體。


      Q:染色后背景值較高?

      A:  1. 洗滌不充分,由于固定劑的殘留而導致高的背景值,應確保在步驟之間用PBS至少洗3次;

      2. 固定不充分可能會導致抗原在組織中的擴散,可降低固定后時間;

      3. 彌散染色,常由組織損傷導致,小心制備組織樣品以避免組織損傷;

      4. 檢測試劑的滲透不充分,制備更薄的切片;

      5. 不同固定劑對于組織抗原影響各異,可優化pH,孵育時間和溫度。

      結果展示

      參考文獻

      Ting Li, Hanqing Guo et.al. Gastric Cancer Cell Proliferation and Survival Is Enabled by a Cyclophilin B/STAT3/miR-520d-5p Signaling Feedback Loop. Cancer Res. 2017 Mar 1;77(5):1227-1240.
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