Western Blot
利用抗原抗體反應，檢測樣本中目的蛋白表達量；檢測基因蛋白表達量最常用的方法，半定量，無法提供基因的細胞定位等信息。
技術原理
Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的各蛋白成分。
結果展示
用目的基因shRNA慢病毒感染A549細胞，3天后收集細胞，提取細胞總蛋白，用western blot進行檢測，相比對照組，shRNA慢病毒感染后的實驗組增殖凋亡相關蛋白表達量改變情況。
參考文獻
Burnette WN. (1981). "'Western blotting': electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate—polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A". Analytical Biochemistry. 112 (2): 195–203.
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