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      TMT

      TMT(Tandem Mass Tag)是Thermo Fisher Scientific開發的一種多肽體外標記技術。通過對不同樣品中的肽段采用不同通道的TMT試劑進行標記,然后進行LC-MS/MS分析,實現樣本蛋白組之間的相對定量。

      技術流程

      TMT技術流程圖

      技術原理

      TMT試劑盒每個通道的報告基團和平衡基團分子量總和是一致的,當肽段用TMT試劑標記后,來源于不同樣本的同一序列的肽段的分子結構和分子量仍保持一致,它們在一級質譜中呈現為同一個信號,一起進入二級質譜分析階段。

      二級質譜中TMT試劑的平衡基團丟失,報告基團從肽段上碎裂下來,肽段自身序列也被碎裂。肽段自身的碎片可用來定性分析肽段的序列組成。報告基團的信號強度比值則能代表來源于不同樣本的該肽段的含量比值。


      TMT技術優勢

      TMT試劑盒每個通道的報告基團和平衡基團分子量總和是一致的,當肽段用TMT試劑標記后,來源于不同樣本的同一序列的肽段的分子結構和分子量仍保持一致,它們在一級質譜中呈現為同一個信號,一起進入二級質譜分析階段。

      因為標記后的肽段可以混合到一起,就可以將混合物一起進行色譜分級,然后再進行質譜分析,這樣能有效增加鑒定數目。





      吉凱基因TMT技術流程:


      吉凱基因TMT優勢

      a.軟硬件先進(儀器為Q Exactive,Q Exactive PLUS和Q Exactive HF-X,軟件為PD2.2/Mascot);

      b.質控嚴格(預實驗中每個樣本都需要進行蛋白質水平和預質譜水平的質檢,不合格的樣本會給予合理建議。正式實驗中對標記效率和儀器狀態也進行嚴格管控,發現不合格則重新開展實驗,確保實驗數據有效);

      c.專業的團隊(團隊成員經驗豐富,能處理幾乎所有類型的樣本分析);

      d.強大的生信分析團隊(除GO,KEGG等常規的分析外,還能進行IPA,趨勢聚類,蛋白質相互作用以及其他個性化分析)。





      吉凱基因TMT成功案例:

      物種 樣本類型 鑒定數量
      細胞 7750
      肝癌組織 6302
      大鼠 7269
      血清 1362

      參考文獻

      1.Zeng L, Zhong J, He G, et al. Identification of nucleobindin-2 as a potential biomarker for breast cancer metastasis using iTRAQ-based quantitative proteomic analysis[J]. Journal of Cancer, 2017, 8(15): 3062.

      2.Shui W, Xiong Y, Xiao W, et al. Understanding the mechanism of thermotolerance distinct from heat shock response through proteomic analysis of industrial strains of Saccharomyces cerevisiae[J]. Molecular & Cellular Proteomics, 2015, 14(7): 1885-1897.

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