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      qPCR

      實時熒光定量PCR通過SYBR Green染料法/Taqman探針法檢測目的基因RNA表達量,可用于多個樣本間目的基因mRNA的半定量比較。

      技術原理

      qPCR即實時熒光定量PCR,是一種以SYBR Green染料法/Taqman探針法進行相對定量檢測服務,即用已知管家基因做為內參照,根據目的基因和管家基因的相對表達作為定量的最后結果。該技術具有準確度,靈敏度高等特點。

      qPCR現已成為一種成熟的mRNA、microRNA、lncRNA等定量手段。其中,Sybr-Green法因為使用方便、價格低廉(相對于Taqman探針法)而被廣泛使用。

      結果展示

      用待研基因shRNA慢病毒感染huh7細胞,感染72小時后收集細胞進行qPCR檢測,結果顯示,經shRNA慢病毒感染后,實驗組huh7細胞中目的基因在mRNA水平的表達量受到抑制,shRNA對目的基因mRNA表達水平的敲減效率達到91.0%

      參考文獻

      Kubista M, et al. The real-time polymerase chain reaction. Mol Aspects Med. 2006, 27(2–3): 95–125.
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