qPCR即實時熒光定量PCR,是一種以SYBR Green染料法/Taqman探針法進行相對定量檢測服務,即用已知管家基因做為內參照,根據目的基因和管家基因的相對表達作為定量的最后結果。該技術具有準確度,靈敏度高等特點。
qPCR現已成為一種成熟的mRNA、microRNA、lncRNA等定量手段。其中,Sybr-Green法因為使用方便、價格低廉(相對于Taqman探針法)而被廣泛使用。
用待研基因shRNA慢病毒感染huh7細胞,感染72小時后收集細胞進行qPCR檢測,結果顯示,經shRNA慢病毒感染后,實驗組huh7細胞中目的基因在mRNA水平的表達量受到抑制,shRNA對目的基因mRNA表達水平的敲減效率達到91.0%