腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優勢:
a. 是研究原代非增殖細胞基因表達的最佳系統:腺病毒感染細胞后,1-2 天即可表達,是研究原代非增殖細胞基因表達的最佳系統;
b. 滴度高:腺病毒系統在轉有 E1 基因的 HEK293 細胞中可進行自我復制,可產生滴度為1010 到1011PFU/mL 的病毒;
c. 載體容量大: 可容納不超過5kb 的片段;d. 不整合到染色體中,無插入致突變性:腺病毒除卵細胞以外,幾乎在所有已知細胞中都不整合到染色體中,因此避免了因整合而引發的潛在的基因突變和隨機效應 。
病毒表達系統 |
腺病毒 (Adenovirus) |
慢病毒 (Lentivirus) |
腺相關病毒 (Adeno-As sociate virus) |
病毒基因組 | 雙鏈DNA病毒 | RNA病毒 | 單鏈DNA病毒 |
復制 | 條件復制 | 不可復制 | 條件復制 |
滴度 | 最高可達1012pfu/ml | 最高可達109TU/ml | 最高可達1012-13v.g/ml |
感染細胞類型 | 感染分裂和不分裂細胞 | 感染分裂和不分裂細胞 | 感染分裂不旺盛的細胞 |
表達豐度 | 高水平表達 | 中到高水平表達 | 高水平表達 |
表達時間 | 快(1-2天) | 慢(2-4天) | 1-2周 |
持續表達時間 |
病毒基因組游離于宿主基因組外, 瞬時表達外源基因 |
病毒基因組整臺于宿主基因組, 長時間、穩定表達外源基因 |
病毒基因組游離于宿主基因組外, 在分裂旺盛的細胞中可長時間表達 |
克隆容量 | 適合表達小于5kb的外源片段 | 適合表達小于4kb的外源片段 | 適合表達小于2.8kb的外源片段 |
免疫原性 | 較高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
安全性 | 可能會引起一些咳嗽流涕 |
暫無發現致病性, 已被用于CAR-T治療作用于人體 |
暫無發現致病性, 已通過歐盟和FDA許可, 用作基因治療藥物的載體 |
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科研-細胞級 | 科研-動物級 |
產品特點 | 可快速獲得的純病毒 |
純度和滴度較高,滴度達1E+10PFU/m以上, 可用于動物實驗 |
適用范圍 | 適用于永生化細胞系,或作為病毒擴增毒種 |
適用于在難以轉染的細胞中表達特定基因, 也可用于動物實驗 |
質量標準 |
滴度≥1E+9 PFU/ml 微生物檢測陰性 |
滴度≥1E+10 PFU/ml 復制性腺病毒水平<1 RCA/3.0×10^10VP 病毒感染滴度/病毒顆粒數(IUVP) > 3.3% 質粒DNA殘留≤4E+8 copy/ml 宿主DNA殘留≤10 μg/ml 微生物檢測陰性 |
吉凱提供完善的腺病毒產品體系,用于操作編碼基因和非編碼基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下腺病毒載體可供您選擇,點擊查看載體圖譜>>
調控方式 | 載體編號 | 元件順序 | 原核抗性 | 真核抗性 |
熒光標記 啟動子 |
RNAi/過表達 啟動子 |
熒光標記 |
過表達 | GV345 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry | Ampicillin | 無 | SV40 | CMV | Cherry |
GV314 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP | Ampicillin | 無 | SV40 | CMV | GFP | |
干擾 | GV119 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 無 | CMV | U6 | GFP |
miRNA-up | GV202 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 無 | CMV | U6 | GFP |
GV317 | CMV-MCS-SV40-EGFP | Ampicillin | 無 | SV40 | CMV | GFP | |
miRNA-down | GV201 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 無 | CMV | U6 | GFP |
腺病毒可有效感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。
代表文獻 吉凱客戶文章Brain Behavior and Immunity,2017.
文獻來源:The long non-coding RNA Neat1 is an important mediator of the therapeutic effect of bexarotene on traumatic brain injury in mice.
2.2 心臟
代表文獻 吉凱客戶文章 Cardiovascular research, 2014, 102(1): 46-55.
文獻來源:Silencing of Pellino1 improves postinfarct cardiac dysfunction and attenuates left ventricular remodeling in mice.
2.3 肝臟
代表文獻 吉凱客戶文章Laboratory lnvestigation,2017,97(9):1020
文獻來源:Paired related homeobox protein 1 regulates PDGF-induced chemotaxis of hepatic stellate cells in liver fibrosis.
代表文獻 European Respiratory Joumal,2010,36(4):907-914.
文獻來源:Overexpression of transforming growth factor-β1 in fetal monkey lung results in prenatal pulmonary fibrosis.
2.5 胰腺
代表文獻 Molecular Therapy ,2011,19(1):60-66.